非洲豬瘟檢測儀現場實驗步驟及樣品前處理：CSY-E96D非洲豬瘟檢測儀可快速畜牧類疾病診斷如非洲豬瘟、禽流感、豬瘟、豬藍耳、偽狂犬等疾病，廣泛應用于養殖場、屠宰場、肉產品深加工企業、檢驗檢疫單位使用。

2007年以來，非洲豬瘟在全球多個國家發生、擴散、流行，特別是俄羅斯及其周邊地區。2017年3月，俄羅斯遠東地區伊爾庫茨克州發生非洲豬瘟疫情，疫情發生地距離我國較近，僅為1000km左右；另外，我國是養豬及豬肉消費大國，生豬出欄量、存欄量以及豬肉消費量均位于全球首位，每年種豬及豬肉制品進口總量巨大，與多個國家貿易頻繁；而且，我國與其它國家的旅客往來頻繁，旅客攜帶的商品數量多、種類雜。因此，非洲豬瘟傳入我國的風險日益加大，一旦傳入，其帶來的直接以及間接損失將不可估量。對此，2017 年 4 月 12 日，我國農業部發布了關于進一步加強非洲豬瘟風險防范工作的緊急通知

非洲豬瘟檢測儀現場實驗步驟及樣品前處理準備工作：

1.請提前20分鐘從冰箱中取出試劑盒，平衡至室溫。

2.從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結晶，屬于正常現象；放置室溫，輕搖均勻，待結晶完全溶解后再配置洗滌液。可將20ml濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋配置成400ml工作濃度的洗滌液，未用完的放回4℃

3.20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

非洲豬瘟檢測儀實驗所需自備試驗器材：

1.檢測儀（450nm）

2.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒溫箱或水浴鍋

4.蒸餾水或去離子水

非洲豬瘟檢測儀樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。

2. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

3. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

4.標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.

5.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

非洲豬瘟檢測儀操作步驟：

1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.設置陰、陽性對照孔和樣本孔，陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照各50μL；

3.待測樣本孔加待測樣本10μL，樣本稀釋液40μL；

4.隨后陰、陽性對照孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗原100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。

6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光水浴鍋孵育15min。

7.每孔加入終止液50μL，15min內，在非洲豬瘟檢測儀450nm波長處測定各孔的OD值。